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原代細胞永生化方法（1）使用SV40T基因，誘導細胞不朽化。SV40的T抗原誘導不同類型的細胞不朽化，在許多文獻中己證實，此方法為簡單且可靠的方法，其機制一直都有詳細記載。（2）大多數(shù)體細胞的端粒縮短至關鍵長度 ,就會發(fā)生細胞生長障礙或細胞衰老 ;腫瘤細胞因有端粒酶活性而使其具有無限分裂的能力。

原代細胞永生化（Prmary Cells Immortalization）是指體外分離培養(yǎng)的原代細胞經過自發(fā)的或受外界因素的影響從增殖衰老危機中逃離，從而具有無限增殖能力的過程。正常組織來源的原代細胞在通常的體外培養(yǎng)條件下可分裂生長，但經過有限次數(shù)的傳代后，就會停止增殖，發(fā)生衰老和死亡。利用基因轉染等技術將外源性永生化基因導入目的細胞內，從而建立永生化細胞株。